Kultury zwierzęce in vitro

Celem zajęć jest zapoznanie studentów ze specyfiką prowadzenia badań na różnych modelach hodowli in vitro. Studenci poznają metody izolacji i prowadzenia hodowli komórek, eksplantów tkanek i całych organów jak również techniki analizowania podstawowych procesów komórkowych i możliwości zastosowania modeli hodowli in vitro w badaniach. Omówiony będzie wpływ czynników mechanicznych i chemicznych na fizjologię komórek in vitro. Przedstawione zostaną różne aspekty hodowli w systemach trójwymiarowych, techniki stosowane w klasycznej inżynierii tkankowej oraz metody biodrukowania i metoda hodowli w systemach organ-on-chip. Po zakończeniu cyklu wykładów i ćwiczeń student powinien sam umieć zaplanować doświadczenia na hodowlach komórek. Ponadto przedmiot pozwoli studentom na opanowanie technik hodowli różnych komórek i tkanek oraz metod prowadzenia podstawowych analiz na materiale pozyskanym z doświadczeń in vitro.

Wykłady- 15 godz. – (7x 90 min)

Tematy wykładów:

1. Metoda hodowli komórek in vitro – (historia, rodzaje hodowli)

2. Metody badania procesów komórkowych w hodowlach komórkowych

3. Hodowle komórek, tkanek i narządów w systemie 3D

4. Inżynieria tkankowa

5. Techniki biodrukowania tkanek i narządów

6. Koncepcja i techniki hodowli organs-on-chip

7. Praktyczne zastosowania metod hodowli in vitro

Ćwiczenia - 15 godz.

Tematy ćwiczeń:

1. Metody hodowli komórek pęcherzyka jajnikowego

2. Izolacja i hodowle komórek układu immunologicznego

3. Izolacja i hodowla komórek nerwowych

4. Klasyczne hodowle eksplantów oraz metoda hodowli na granicy faz

5. Metody oznaczanie cytotoksyczności w hodowlach in vitro

6. Metody badania procesu apoptozy komórek

7. Wykorzystanie barwników fluorescencji w analizie hodowli komórkowych

Literatura:

1. Davis J.M. Basic cell culture. Oxford University Press. 2001.

2. Freshney R.I. Culture of animal cells. A manual of basic technique. 4th Edition. Wiley-Liss. 2001.

3. Fundamental techniques in cell culture. A laboratory handbook. SIGMA. 2002.

4. Stokłosowa S. Hodowla komórek i tkanek. Wydawnictwo Naukowe PWN. Warszawa 2004

Wiedza:

Ma podstawową wiedzę dotyczącą hodowli in vitro komórek zwierzęcych, wykorzystywanych podłoży i zastosowania technik in vitro w biotechnologii.

Zna podstawowe techniki pracy eksperymentalnej i laboratoryjnej w warunkach in vitro i metody wykorzystania materiału biologicznego w biotechnologii. Posiada wiedzę na temat metod inżynierii tkankowej

Ma wiedzę z zakresu wykorzystania modeli hodowli komórek in vitro do badań toksykologicznych i endokrynologicznych.

Umiejętności:

Potrafi zaprojektować pracownię i pracować w pracowni In vitro.

Potrafi podejmować działania z wykorzystaniem odpowiednich metod, technik do prowadzenia podstawowych hodowli pierwotnych komórek zwierzęcych.

Potrafi zastosować typową technikę i jej optymalizację do analizy procesów komórkowych w hodowlach in vitro.

Planuje i wykonuje proste zadania badawcze i projektowe indywidualnie oraz w zespole, w tym prowadzi hodowle komórek.

Dokonuje pomiarów parametrów procesów proliferacji, nekrozy i apoptozy, zna metodę barwienia hodowli komórkowych i wykonywania preparatów mikroskopowych. Potrafi korzystać z podstawowego sprzętu i aparatury stosowanej w laboratorium kultur in vitro do oceny żywotności i proliferacji komórek.

Kompetencje społeczne:

Potrafi pracować i współpracować w zespole, ma świadomość odpowiedzialności za wspólnie planowane i realizowane zadania.

Potrafi formułować obiektywne opinie na temat podstawowych zagadnień biotechnologicznych.

Zaliczenie na ocenę na podstawie odpowiedzi na 5 pytań opisowych/otwartych. Czas trwania: 1 godzina zegarowa

Punktacja zaliczenia części dotyczącej wykładów:

Za każdą odpowiedź prawidłową – 2 punkty

Max ilość punktów: 10

Ocena dostateczna od 50%

Zakres ocen wg ilości uzyskanych punktów:

5-6 ocena dostateczna

6,5- ocena + dostateczna

7-8- ocena dobra

8,5- ocena + dobra

9-10 ocena bardzo dobra

Ocena końcowa z przedmiotu będzie średnią wyliczoną z ocen z ćwiczeń i z wykładów.